产志贺毒素大肠杆菌stx2基因荧光定量PCR检测方法的建立及应用(英文)

文献类型： 中文期刊

第一作者： 汪伟

作者： 汪伟;张雪寒;王润;何孔旺;温立斌;倪艳秀;周俊明;王小敏;李彬

作者机构：

关键词： 产志贺毒素大肠杆菌;志贺毒素2基因;荧光定量PCR

期刊名称： Agricultural Science & Technology

ISSN： 1009-4229

年卷期： 2014 年 09 期

页码： 1473-1477

摘要： [目的]建立检测产志贺毒素性大肠杆菌(STEC)stx2基因荧光定量PCR方法。[方法]根据GenBank中已发表的STEC stx2基因序列,在保守区域设计PCR引物和探针,构建重组质粒作为阳性模板,优化反应条件,建立荧光定量PCR方法。[结果]利用优化的荧光定量PCR反应体系建立了标准曲线。表明起始模板浓度与Ct值之间线性关系好,相关系数R2均达0.995以上;此方法特异性好,对10种非STEC肠道病菌无特异性扩增;敏感性高,初始模板的检出下限达1.0×102拷贝数/μl;重复性好,批内、指间变异系数均分别小于1%和5%。[结论]该研究成功建立了检测STEC stx2基因的荧光定量PCR方法,为快速检测样品中STEC提供了技术手段。

分类号： S852.61

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