文献类型： 中文期刊
第一作者： 刘悦
作者： 刘悦;刘建青;张春雨;苏颖;李小宇;王永志
作者机构：
关键词： 珠葱;葱潜隐病毒;SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR
期刊名称： 农业生物技术学报
ISSN： 1674-7968
年卷期： 2023 年 31 卷 003 期
页码： 659-666
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 葱潜隐病毒(Shallot latent virus,SLV)是危害珠葱(Allium cepa var.aggregatum)等葱属植物的主要病毒之一,在葱属植物种植区普遍存在.本研究根据GenBank中已登录的SLV外壳蛋白(coat protein,CP)基因保守区,设计并合成1对特异性引物,通过对引物浓度和退火温度进行优化,建立了基于SYBR GreenⅠ的SLV实时荧光RT-PCR(reverse transcription PCR)检测方法.该方法标准曲线Ct值与模板浓度的对数呈良好的线性关系,扩增效率为94.529%,相关系数R2为0.9996;与胡葱黄条病毒(Shallot yellow stripe virus,SYSV)、洋葱黄矮病毒(Onion yellow dwarf virus,OYDV)和青葱X病毒(Shallot virus X,SVX)均无交叉反应;最低检出限为10-7倍稀释cDNA,为常规RT-PCR的1000倍;组内和组间变异系数分别为0.02%~0.63%和0.03%~1.24%,表明该方法稳定性好.利用该方法对珠葱叶和鳞茎的SLV含量进行测定,并对50份疑似SLV感染的珠葱样品进行检测,结果表明,珠葱叶中SLV含量明显高于鳞茎,且SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR检出46份阳性样品,检出率较常规RT-PCR高6%.本研究基于SYBR GreenⅠ建立的SLV实时荧光RT-PCR方法为珠葱SLV的快速检测提供技术支持.
分类号： S432.1
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[1]珠葱组培脱毒技术研究. 张春雨,王晨,刘建青,战笑蕾,李小宇,王永志. 2024
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