牛副流感病毒3型NP单抗的制备及初步应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 吕闯

作者: 吕闯;朱远茂;董秀梅;蔡红;于作;高欲燃;薛飞

作者机构:

关键词: 牛副流感病毒3型;核衣壳蛋白;单克隆抗体;特异性

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2011 年 33 卷 12 期

页码: 970-973

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为制备牛副流感病毒3型(BPIV3)核衣壳蛋白(NP)单克隆抗体(MAb),本研究利用原核表达并纯化的重组NP(rNP)免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合。采用以BPIV3为检测抗原的间接ELISA方法筛选阳性细胞克隆,经3次克隆纯化后获得1株稳定分泌抗NP特异性MAb的杂交瘤细胞株(5E5)并制备腹水,采用rNP及BPIV3包被的ELISA效价分别是2×106和1.28×105。间接ELISA、western blot、IFA试验表明该MAb具有良好的反应性和特异性。经抗体亚类鉴定该MAb亚类为IgG1/κ。特异性试验表明该MAb不与牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒反应。免疫组化试验表明该MAb可以检测BPIV3感染动物体内的病原。该MAb还可用于建立检测BPIV3病原及抗体的诊断方法,同时为研究NP的结构和功能提供了条件。

分类号: S852.65

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