基因组DNA快速提取及在转基因大豆检测中的应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 陈欲
作者: 陈欲;汪小福;陈笑芸;彭城;徐俊锋;李玥莹
作者机构:
关键词: 基因组;DNA快速提取;转基因检测;现场检测
期刊名称: 中国油料作物学报
ISSN:
年卷期: 2021 年 001 期
页码: 70-76
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 基因组DNA的提取是DNA分子水平研究和检测的重要环节。为补充完善现场检测方法,根据硅膜吸附DNA的特性,结合过滤膜和注射器,开发一种现场快速提取植物基因组DNA的方法。选取大豆、棉花、油菜、玉米、水稻5种主要作物的叶片和种子为样品提取DNA,利用PCR和普通重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification, RPA)对快速提取和QIAGNE试剂盒提取的DNA进行内源基因的扩增。结果显示,快速方法不需要离心机,现场3分钟完成DNA提取;在DNA得率上要高于QIAGEN方法,但在DNA纯度上低于QIAGEN方法。不过两种方法提取的DNA都能满足PCR和RPA的需要。利用DNA快速提取方法结合普通PCR、荧光RPA和荧光定量PCR对转基因大豆SHZD32-1进行实际检测,3种方法的检测结果一致,均能准确检出大豆SHZD32-1的转基因成分。
分类号: S565.1
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