猪外周血单个核细胞cDNA酵母表达文库的构建及与猪瘟病毒E2蛋白相互作用细胞蛋白的筛选

文献类型： 中文期刊

第一作者： 廖亚金

作者： 廖亚金;李素;贺番;何文瑞;董泓;冯烁;孙元;仇华吉

作者机构：

关键词： 猪瘟病毒;PBMC;cDNA文库;酵母双杂交;E2蛋白

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2013 年 35 卷 09 期

页码： 707-710

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究猪瘟病毒(CSFV)蛋白与宿主细胞蛋白之间的相互作用,本研究通过SMART技术合成猪外周血单个核细胞(PBMC)双链cDNA,以携带与载体pGADT7-Rec重组位点同源序列的特异引物经long-distance PCR扩增双链cDNA。纯化双链cDNA并与载体pGADT7-Rec共转化酵母菌株Y187,经同源重组构建PBMC cDNA酵母表达文库。以CSFV E2蛋白为诱饵进行酵母双杂交筛选,得到阳性克隆根据序列比对分析结果,进一步进行共转化验证。结果显示筛选到17个与CSFV E2蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,基因注释(GO)分析表明这些蛋白分别参与免疫、代谢、细胞生长与增殖、生物调节等过程,为研究它们与CSFV E2的相互作用奠定了基础。

分类号： S828

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