基于高分辨率熔解曲线分析技术鉴别丹参及其混伪品

文献类型: 中文期刊

第一作者: 赵景莹

作者: 赵景莹;张玉娟;柳展基;赵方洲;汤慧丽;王宪昌;朱彦威;田北京;韩金龙;邬爽;高春华;单成钢

作者机构:

关键词: 高分辨率熔解曲线;分子鉴定;丹参;伪品

期刊名称: 山东农业科学

ISSN: 1001-4942

年卷期: 2024 年 56 卷 009 期

页码: 116-123

摘要: 本研究旨在建立一种基于高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)技术高效鉴别丹参及其混伪品的方法.研究采用硅胶吸附柱法纯化基因组DNA,并针对鼠尾草rDNA ITS2区序列设计特异性引物,通过依次对引物浓度、DNA模板浓度、退火温度和循环次数进行系统优化,建立了ITS2熔解曲线模型,并采用HRM技术对不同来源丹参及其混伪品(甘西鼠尾草、云南丹参和鼠尾草)进行鉴别.结果表明,在最适引物浓度为2.5~10.0 μmol/L,DNA模板浓度为26.95~53.90 ng/μL,退火温度为58℃,循环数为35~45时可获得稳定、均一、特异的PCR扩增曲线.该方法通过对比熔解温度(Tm)即可实现对丹参与甘西鼠尾草、云南丹参及鼠尾草的真伪鉴别,在丹参及其伪品的快速检测方面具有独特的优势.

分类号: S567.5+3

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