脊尾白虾热休克蛋白HSP90基因的原核表达与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 韩俊英

作者： 韩俊英;李健;李吉涛;陈萍;李华

作者机构：

关键词： 脊尾白虾;热休克蛋白90;原核表达

期刊名称： 渔业科学进展

ISSN： 1000-7075

年卷期： 2011 年 32 卷 05 期

页码： 46-52

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将脊尾白虾热休克蛋白90基因克隆到原核表达载体pET-30a中,经酶切验证和DNA测序鉴定后,将重组质粒转化表达宿主大肠杆菌Rosetta,优化温度、时间、IPTG和OD600表达条件进行诱导表达,收集菌液,进行SDS-PAGE和质谱检测,并用Quantity one软件分析蛋白表达水平。结果表明,成功构建了含脊尾白虾HSP90基因的重组表达载体pET-30a-HSP90,表达目的蛋白相对分子量为82.7kD,为HSP90蛋白。通过条件优化认为重组菌株Rosetta/pET-30a-HSP90的最佳诱导温度为37℃,最佳IPTG浓度为1.0mmol/L,最佳诱导时机和诱导时间分别为0.58h、7h。

分类号： S917.4

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