表达猪Viperin蛋白重组腺病毒的构建及其对PRRSV复制的抑制作用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 方剑玉
作者: 方剑玉;朱文豪;郭小参;白献晓;李海利;徐引弟;郎利敏;王治方;王克领
作者机构:
关键词: 猪Viperin蛋白;重组腺病毒;抗病毒活性;猪繁殖与呼吸综合征病毒
期刊名称: 河南农业科学
ISSN: 1004-3268
年卷期: 2017 年 09 期
页码: 126-131
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为研究猪Viperin蛋白对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)复制的抑制作用,通过RTPCR方法扩增猪Viperin基因,并克隆入腺病毒穿梭载体p Ad Track-CMV,经菌液PCR、酶切鉴定后进行测序。将PmeⅠ内切酶线性化的重组穿梭载体质粒(p Ad Track-s VIP)电转化大肠杆菌BJ5183,与腺病毒骨架载体p Ad Easy-1进行同源重组,提取重组后的腺病毒质粒,经内切酶PacⅠ线性化后转染HEK-293A细胞,装配成完整的病毒粒子r Ad-s VIP。重组腺病毒r Ad-s VIP感染细胞后,可见绿色荧光蛋白的表达。RT-PCR、Western blot检测结果表明,重组腺病毒r Ad-s VIP可正确表达猪Viperin蛋白,且表达的猪Viperin蛋白具有良好的反应原性,对PRRSV的复制具有明显的抑制作用。
分类号: S852.651
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