猪MyD88基因的原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 曾爽

作者： 曾爽;陈国华;崔青;房永祥;景志忠

作者机构：

关键词： 猪MyD88分子;原核表达;大肠埃希菌

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2010 年 31 卷 12 期

页码： 1-5

收录情况： 北大核心

摘要： 采用PCR方法从pGEM-pMyD88重组质粒中克隆了猪MyD88分子全长基因,构建了无信号肽序列的原核表达载体pET-30a-pMyD88-ED,在不同IPTG浓度和时间下进行诱导表达,利用切胶洗脱法纯化表达的融合蛋白。结果表明,在IPTG诱导浓度为0.05 mmol/L,诱导时间为6 h时表达量达到最大,SDS-PAGE分析表明表达出约35 ku的融合蛋白,主要以包涵体的形式存在;通过切胶纯化后,融合蛋白的纯度可达90%;Western blot分析显示,表达的融合蛋白能被抗His标签的单克隆抗体识别,说明目的蛋白在大肠埃希菌中得到了成功表达。

分类号： S852.4

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