LIPI-4 EⅡA基因对单核细胞增生性李斯特菌重要毒力基因转录调控作用的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘彩霞

作者： 刘彩霞;高盛杰;寇丽君;马勋;王静;孔翠莲;史唯地;吕双飞;任慧杰;康立超;殷月兰

作者机构：

关键词： 单核细胞增生性李斯特菌;毒力岛4;膜透性酶ⅡA;缺失株;毒力基因

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2022 年 012 期

页码： 1269-1276

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探究单核细胞增生性李斯特菌（LM）毒力岛4（LIPI-4）的膜透性酶ⅡA（EⅡA）基因在LM中的毒力作用，本研究利用同源重组技术构建了具有遗传稳定性的LM928菌株EⅡA基因缺失株（LM928ΔEⅡA）和回补株（CLM928ΔEⅡA），通过对缺失株、回补株和亲本株生长特性测定分析EⅡA基因对LM体外生长能力的影响。提取各菌株RNA，反转录为c DNA后通过real-time PCR检测各菌株在体外培养条件下LM重要毒力基因的转录水平，分析EⅡA基因缺失对LM毒力基因转录水平的影响。结果显示，缺失EⅡA基因后不影响细菌在体外的生长能力，但细菌plcB和inlA基因的转录水平显著下调（P＜0.05）,hly、prfA、plcB、inlA、inlB、inlC和mpl基因的转录水平极显著下调（P＜0.01）,plcA基因的转录水平极显著上调（P＜0.01），而actA基因的转录水平无明显变化（P＞0.05）。将LM928、LM928ΔEⅡA和CLM928ΔEⅡA菌株分别感染人脑微血管内皮细胞（HCMEC/D3）后，采用CCK8法检测EⅡA基因对HCMEC/D3活性的影响，同时通过胞内增殖试验检测EⅡA基因对LM胞内增殖的影响，进一步采用real-time PCR方法检测EⅡA对细胞毒力基因转录水平的影响，结果显示，与LM928组相比，LM928ΔEⅡA组HCMEC/D3细胞活性无明显改变；LM928ΔEⅡA感染HCMEC/D3后6 h～12 h，胞内LM928ΔEⅡA载菌量极显著高于胞内LM928载菌量（P＜0.01），在感染HCMEC/D3后2 h～12 h，胞内LM928ΔEⅡA载菌量也极显著高于胞内CLM928ΔEⅡA的载菌量（P＜0.01）。相对于亲本株，LM928ΔEⅡA感染的细胞中毒力基因prf A、plc A、plc B、inl A、 inl B、inl C和mpl转录水平均极显著上调（P＜0.01）,actA基因的转录水平显著上调（P＜0.05）,hly基因的转录水平极显著下调（P＜0.01）。本研究结果首次证实LIPI-4中EⅡA基因对LM体外生长无影响，但其对体内、外LM毒力因子的转录均具有显著的调控作用，提示LM LIPI-4可能通过EⅡA参与调控细菌毒力，该结果为进一步研究LIPI-4在LM致病中的作用奠定了基础。

分类号： S852.61

  • 相关文献

[1]食品中单核细胞增生性李斯特菌的污染及耐药现状. 邵美丽,杨帆,刘娣. 2009

[2]加工环境中单核细胞增生性李斯特菌耐药特征分析. 吴立婷,吴新宇,庞茂达,何涛,包红朵,周艳,孙利厂,王冉,张辉. 2018

[3]基因分型技术在单核细胞增生性李斯特菌监测溯源上的应用. 蒋兵,谢建华,汪子淳,梁望旺,杨泽林,蔺露,张婷娟,彭远义,聂奎,方仁东. 2018

[4]噬菌体裂解酶结构域重构及其裂解功能分析. 张辉,周艳,包红朵,杨振泉,朱如意,周晨露,张莉莉,王冉. 2017

[5]李斯特菌噬菌体的分离鉴定及其裂解特性. 张辉,王冉,包红朵. 2012

[6]李斯特菌噬菌体体内消长规律及其免疫特性分析. 张辉,王冉,包红朵. 2012

[7]携带质粒李斯特菌耐药及重金属抵制特性研究. 张辉,包红朵,周艳,张莉莉,王冉. 2015

[8]哈尔滨市鲜肉中单核细胞增生性李斯特菌的分离鉴定及耐药性分析. 尹录,杜艳芬,赫明雷,司微,刘慧芳,王春来,彭玮,王聃,李继昌,邵美丽,刘思国. 2009

[9]Sigma B基因缺失对单核细胞增生性李斯特菌毒力的影响. 杨丽红,孟庆玲,乔军,才学鹏,张再超,蔡扩军,王为升,王俊伟,陈创夫. 2013

[10]哈尔滨市鲜肉中单核细胞增生性李斯特菌的分离鉴定及耐药性分析. 尹录,杜艳芬,赫明雷,司微,刘慧芳,王春来,彭玮,王聃,李继昌,邵美丽,刘思国. 2009

[11]SigmaB基因缺失对单核细胞增生性李斯特菌毒力的影响. 杨丽红,孟庆玲,乔军,才学鹏,张再超,蔡扩军,王为升,王俊伟,陈创夫. 2013

[12]单核细胞增生性李斯特菌感染ICR小鼠模型的建立. 尹海畅,吕兴锋,刘思国,王伟,王建超,孟庆文. 2013

[13]InlA/InlB基因的双缺失对单增李斯特菌毒力的影响. 陈云飞,王丽娜,王鹏雁,蒋建军,魏丽. 2015

[14]肠出血性大肠杆菌0157:H7AhlyAstxAtoxB基因缺失株的构建. 张雪寒,何孔旺,赵攀登,栾晓婷,叶青,温立斌,倪艳秀,周俊明,李彬,王小敏,郭容利,俞正玉,茅爱华,吕立新. 2011

[15]EHEC O157:H7 z3276基因缺失株构建及其生物学特性. 张碧成,张雪寒,孙小涵,范红结,何孔旺. 2017

[16]LPXTG基序蛋白lmo0160基因缺失对单增李斯特菌生物膜形成的影响. 张奇文,凌晨,马勋,薄新文,杜冬冬,钱凌霄,李红欢. 2017

[17]LPXTG基序蛋白lmo0159基因缺失株的构建及对单增李斯特菌环境适应能力的影响. 张奇文,凌晨,杜冬冬,钱凌霄,李红欢,薄新文,马勋. 2018

[18]4型副猪嗜血杆菌crp基因缺失株的构建及生物学特性分析. 徐引弟,王治方,焦文强,朱文豪,李海利,王克领. 2023

[19]肠出血性大肠杆菌O157∶H7 toxB基因缺失株的构建. 张雪寒,何孔旺,赵攀登,栾晓婷,叶青,温立斌,倪艳秀,李彬,郭容利,王小敏,周俊明,俞正玉,茅爱华,吕立新. 2012

[20]肠炎沙门氏菌tu-fA基因缺失株的构建及其生物学特性研究. 司微,于申业,陈利苹,刘思国,李广兴. 2015

作者其他论文 更多>>

微信小程序