文献类型： 中文期刊
第一作者： 杨斯涵
作者： 杨斯涵;赵其平;韩红玉;朱顺海;李莎;翟颀;梁思婷;杨亮宇;黄兵
作者机构：
关键词： 柔嫩艾美耳球虫;沉默信息调节因子2;DF-1细胞;BHK细胞;真核表达
期刊名称： 中国动物传染病学报
ISSN： 1674-6422
年卷期： 2015 年 23 卷 02 期
页码： 53-59
摘要： 为构建柔嫩艾美耳球虫沉默信息调节因子2(Eimeria tenella silent information regulator 2,Et SIR2)的真核表达质粒,以柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子c DNA为模板,PCR扩增出Et SIR2基因,PCR产物经酶切回收纯化目的片段后与经相应酶切的真核表达载体p CAGGs连接。连接产物经PCR和酶切鉴定,再经测序鉴定正确后,分别转染DF-1细胞和BHK细胞进行表达,用Western blot和间接免疫荧光鉴定Et SIR2基因的表达情况。结果表明:成功扩增了Et SIR2基因,长度为909 bp;Western blot可见大小约为37 k Da的表达蛋白条带;间接免疫荧光可以检测到特异性绿色荧光,表明成功构建了Et SIR2的真核表达质粒p CAGGsEt SIR2,并能在哺乳动物细胞和禽类细胞中表达。该研究结果为深入研究Et SIR2的生物学特性和球虫DNA疫苗的研制打下了基础。
分类号： S852.723
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