转基因大豆MON89788转化体特异性定性PCR检测(摘要)(英文)

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李飞武

作者： 李飞武;李葱葱;董立明;邢珍娟;张明

作者机构：

关键词： 转基因大豆;MON89788转化体;定性PCR

期刊名称： Agricultural Science & Technology

ISSN： 1009-4229

年卷期： 2010 年 03 期

页码： 88-92

摘要： [目的]建立MON89788大豆转化体特异性定性PCR检测方法。[方法]利用TAIL-PCR技术分离MON89788大豆的3′端旁侧序列,据此序列设计3条特异性引物用于旁侧序列的扩增。经过3轮PCR扩增,获得特异性扩增产物,将此产物回收后克隆到pMD-18T载体上测序,所得序列用Vector NTI分析,并提交NCBI进行序列比对。并对该方法的特异性和灵敏度进行测试。[结果]获得了1 142 bp的3′端旁侧序列。经Blast检索比对,该序列包括2部分,1 ～618 bp为载体序列(E9终止子部分序列和LB序列),619 ～1 142 bp为大豆基因组序列;依据该序列建立的PCR检测方法能特异性地从MON89788大豆中扩增出170 bp的产物,检测灵敏度达到0.05%,约为40个起始模板拷贝。[结论]该研究建立的方法特异性强、灵敏度高,可适用于MON89788大豆检测。

分类号： S565.1

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