抗猪肺炎支原体特异性P36蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 胡茂志

作者： 胡茂志;焦新安;潘志明;邵国青;刘秀梵

作者机构：

关键词： 猪肺炎支原体;P36蛋白;单克隆抗体

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2006 年 26 卷 06 期

页码： 619-621

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 表达P36基因的重组菌BL21(6P-1-P36)经诱导表达,超声波裂解后高速离心,分别收集上清和沉淀。可溶性表达产物亲和层析纯化后用于单抗筛选;同时,用GST-P36包涵体抗原腹腔注射免疫BALB/c小鼠(400μg/只)。利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了1株能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株5A7-2。生物学特性鉴定表明,腹水单抗的间接ELISA效价为1∶2.5×106;免疫球蛋白亚类为IgG2a。免疫印迹结果显示,腹水单抗能与GST-P36融合蛋白反应而不与谷胱苷肽转移酶(GST)反应,并且在猪肺炎支原体(Mycop lasma hyopneumoniae,Mhp)蛋白36000位置也有明显的条带,说明5A7-2所分泌的是针对MhpP36蛋白的单抗。P36蛋白是Mhp种特异性蛋白,其单克隆抗体的制备,为Mhp种特异性检测方法的建立奠定了基础。

分类号： S852.5

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