兔源F型多杀性巴氏杆菌环介导等温扩增快速检测方法的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 王锦祥
作者: 王锦祥;孙世坤;陈岩峰;陈冬金;桑雷;谢喜平
作者机构:
关键词: 兔;F型多杀性巴氏杆菌;fcbD基因;LAMP快速检测方法;
期刊名称: 中国兽医学报
ISSN: 1005-4545
年卷期: 2022 年 003 期
页码: 490-495
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为了建立检测兔源F型多杀性巴氏杆菌的快速检测方法,本试验根据F型多杀性巴氏杆菌fcbD基因的保守序列设计了2对特异性引物,经反应条件优化,建立了检测兔源F型多杀性巴氏杆菌的环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法。结果显示,该LAMP快速检测方法的最优反应条件为:外引物和内引物的浓度比为1∶7、反应温度为65℃、反应时间为60 min。该方法特异性强,对兔源A型和D型多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和阴性对照(灭菌ddH2O)均无交叉反应。该方法敏感性高,最低检出限为1×10~2拷贝/μL的兔源F型多杀性巴氏杆菌基因组DNA,是普通PCR方法的10倍。此外,该方法重复性好,准确性高。该方法的建立为兔源F型多杀性巴氏杆菌的快速检测提供了有力的技术支撑。
分类号: S852.61
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