蚜虫基因RNAi载体的构建及其在转基因烟草中dsRNA的表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高朝宝

作者： 高朝宝;李晓明;彭明;崔百明

作者机构：

关键词： 转基因;RNA干扰;Northern杂交;dsRNA;Cathepsin B基因

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2011 年 27 卷 15 期

页码： 229-232

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： RNAi机制可以通过dsRNA诱导同源mRNA的降解,从而导致该基因转录后沉默。RNA干扰作用从发现以来就具有了利用转录后基因沉默(PTGS)来进行抗虫的一种潜在可能性。针对dsRNA的这种作用,研究中提取蚜虫RNA,克隆出蚜虫Cathepsin B基因的干扰片段并构建出RNAi载体,转入本氏烟草中,在转基因烟草体内表达dsRNA。成功构建RNAi载体后,通过农杆菌转化和叶盘法将RNAi载体导入烟草中并采用组织培养方法培养出转基因烟草,通过PCR鉴定显示15株生根的转基因烟草中14株显示阳性。提取转基因烟草的RNA进行RT-PCR和Northern表达分析显示转基因烟草植株中dsRNA表达的存在。实验结果说明了在转基因植物体内表达RNAi载体可以产生dsRNA,从而在蚜虫进食植物时达到利用dsRNA抗蚜虫的作用。

分类号： S572

  • 相关文献

[1]马铃薯甲虫RNA干扰高效致死基因的筛选. 米热古丽·胡尔西达,付开赟,徐晴玉,吐尔逊·艾合买提,丁新华,何江,郭文超. 2019

[2]镰形扇头蜱Subolesin基因的长链dsRNA电转化和干扰效果研究. 路鹏云,龚海燕,曹杰,周勇志,张厚双,李国清,周金林. 2015

[3]高效靶向降解烟草花叶病毒核酸的dsRNA筛选与大量制备. 徐翔,解屹,宋丽云,申莉莉,李莹,王勇,刘明宏,刘东阳,王小彦,赵存孝,王凤龙,杨金广. 2021

[4]凋亡抑制蛋白基因dsRNA转基因烟草表达载体的构建. 郭强,褚栋,范仲学. 2013

[5]RNA干扰技术抑制病毒复制的研究进展. 姜法铭,缪德年,崔立. 2006

[6]腺苷高半胱氨酸水解酶基因dsRNA对马铃薯甲虫幼虫毒力测定. 李晓旭,郭文超,付开赟,李国清,吐尔逊,何江. 2015

[7]豌豆蚜防控的关键RNAi靶标基因筛选与分析. 宗诗轩,李涛,黄清,程保平,赵弘巍. 2023

[8]家蚕RNAi效率相关核酸酶基因对RNAi效率的影响. 陈咏琪,尹延萍,冯嘉伟,白新宇,李庆荣,钟仰进,杨婉莹. 2023

[9]储存条件对表达马铃薯甲虫腺苷高半胱氨酸水解酶基因dsRNA的大肠杆菌生物活性的影响. 李晓旭,付开赟,李国清,王刚,吐尔逊,何江,郭文超. 2015

[10]松材线虫mapk基因克隆及RNAi效应分析. 王殿东,李莹,李娟,谢丙炎,陈国华. 2016

[11]显微注射构建烟粉虱的RNAi技术体系. 李如美,王少丽,张友军. 2015

[12]转病毒来源发夹RNA小麦表现对大麦黄矮病毒的抗性. 张文蔚,肖红,李世访,成卓敏. 2007

[13]花生AhFAD2基因抑制表达的转基因后代分析. 徐平丽,唐桂英,毕玉平,柳展基,单雷. 2018

[14]hpRNA和pac1基因介导抗大麦黄矮病毒转基因小麦研究. 张文蔚,肖红,李世访,成卓敏. 2006

[15]转基因RNAi技术在动物抗病毒育种中的应用. 叶明强,邝哲师,赵祥杰,吴福泉,李庆荣,肖阳,罗国庆. 2012

[16]甘蓝型油菜Fad2基因的RNA干扰及无筛选标记高油酸含量转基因油菜新种质的获得. 陈苇,李劲峰,董云松,李根泽,寸守铣,王敬乔. 2006

[17]菊花DgLsL基因RNAi表达载体的构建及遗传转化. 石晓,张冬菊,卫晶晶,杨树华,葛红. 2012

[18]RNA干扰高油GmPEPc基因转入大豆研究. 张原宇,董英山,于盛竹,邢国杰,李桐,郑惠景,张玲. 2017

[19]用差减抑制杂交方法鉴定太谷核不育小麦花药败育过程中的特异表达基因. 常青山,周荣华,余增亮,贾继增. 2003

[20]棉花纤维特异表达基因Gh F1的分离及鉴定. 孙杰,李艳军,李园莉,汪若海. 2005

作者其他论文 更多>>

微信小程序