貂肠炎病毒微滴数字PCR检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 商金源

作者： 商金源;叶京飞;罗国良;王振军;冯二凯;王春霞;贾北宁;李斌茹;赵宗正;陈明军;魏先力;程悦宁

作者机构：

关键词： 貂肠炎病毒;微滴数字PCR;定量检测

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2023 年 002 期

页码： 156-162

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 建立一种貂肠炎病毒（MEV）微滴数字PCR（ddPCR）方法，对貂肠炎病毒的定量诊断提供技术支持。在实时荧光定量PCR（qPCR）检测方法的基础上，建立了貂肠炎病毒微滴数字PCR方法，优化了该检测方法的反应条件，并评估了其敏感性、特异性、重复性。结果显示，建立的ddPCR方法最佳引物和探针终浓度分别为900和250 nmol/L，最佳退火温度为55℃，最佳升降温速度为2.5℃/s，本方法的最低检测下限为1.07×10~0copies/μL，未发现与常见疫病病毒存在交叉反应，重复性试验的变异系数小于5%。采用该微滴数字PCR和实时荧光PCR对40份水貂肠道、粪便样品进行检测，检测结果与临床检验结果相符。结果表明，本研究中建立的微滴数字PCR方法敏感性高、特异性强、重复性好，适用于临床样品的貂肠炎病毒核酸检测，为貂肠炎病毒感染的早期检测提供了技术支持。

分类号： S858.92

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