山羊痘病毒P32基因真核表达载体的构建及表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 谢芳

作者： 谢芳;张强;颜新敏;吴国华;李健;朱海霞;郭爱疆;韩若婵;施程洪;鞠厚斌;朱彩珠;岳城;才学鹏

作者机构：

关键词： 山羊痘病毒;P32基因;毕赤酵母;诱导表达

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2009 年 08 期

页码： 982-985

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从重组克隆载体pMD18-P32中扩增出山羊痘病毒P32基因,与毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9K相连接,构建重组表达载体pPIC9K-P32。重组质粒pPIC9K-P32用SalⅠ线性化后,与毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115混合后电转化,使重组表达载体与酵母染色体发生同源重组。采用G418抗性梯度筛选法得到高拷贝重组菌株,甲醇诱导目的基因表达。SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,用酵母成功表达出了31000的重组蛋白,该蛋白具有生物学活性,能被山羊痘阳性血清识别。

分类号： S852.65

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