基于热不稳定区段分析和二硫键预测的玉米赤霉烯酮脱毒酶ZLHY-6热稳定性改造

文献类型: 中文期刊

第一作者: 杜昊澜

作者: 杜昊澜;骆树娟;Tosin Victor Adegoke;刘阳;邢福国;高吉慧;郑永权

作者机构:

关键词: 玉米赤霉烯酮;脱毒酶ZLHY-6;热稳定性;定点突变;分子动力学模拟;热不稳定区段;二硫键

期刊名称: 食品安全质量检测学报

ISSN:

年卷期: 2022 年 022 期

页码: 7150-7157

摘要: 目的 基于热不稳定区段分析和二硫键预测,探索定点突变改造提高ZLHY-6的热稳定性的可行性。方法 基于分子动力学模拟设计两个策略以提高ZLHY-6的热稳定性。策略一:寻找ZLHY-6热不稳定区段,对区段内氨基酸进行计算机虚拟饱和突变,根据突变自由能变(ΔG)筛选结果选取了10个突变体。策略二:通过预测,在ZLHY-6分子内引入二硫键,每个突变体引入1对,共计5个突变体。结果 突变体H134W和Q45C/A253C在45℃热处理20min后,其相对酶活分别为野生型的10倍和3.1倍,并保留了对ZEN一定的活性(41.33%、102.67%)。通过分子动力学分析和结构模拟发现,突变的引入可能削弱了构象的波动性,提升了结构刚性,从而提升了蛋白的热稳定性。结论 热不稳定氨基酸突变和二硫键构建在脱毒酶ZLHY-6改造上具有可行性, ZLHY-6热稳定性的增强提高了其在工业上的应用潜力,这一结果也为探索酶的计算机辅助手段改造提供策略基础。

分类号: TS210.1

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