尼罗罗非鱼β-actin基因启动子的分离及其在真核细胞中的活性验证

文献类型： 中文期刊

第一作者： 邹芝英

作者： 邹芝英;王茂元;李大宇;杨弘

作者机构：

关键词： 尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus);β-肌动蛋白;启动子;绿色荧光蛋白;转染

期刊名称： 淡水渔业

ISSN： 1000-6907

年卷期： 2011 年 41 卷 01 期

页码： 80-84

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用高保真PCR方法从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)基因组DNA中分离出β-actin基因启动子序列,将β-actin基因启动子插入pN1-EGFP构建成真核细胞表达载体pEGFP-β-actin,并通过脂质体转染法将重组载体导入人胚肾上皮细胞HEK 293T,荧光显微镜下观察外源基因EGFP在细胞中的表达情况。结果显示:β-actin基因启动子调控区具有典型的启动子特征,含有TATA Box、CArG和CCAAT Box 3个重要的顺式作用元件。荧光显微镜下观察到50%～60%的HEK 293T细胞中发出绿色荧光,显示尼罗罗非鱼β-actin基因启动子能够驱动EGFP的转录和表达,具有较好的活性,为构建"全鱼"转基因罗非鱼的研究奠定基础。

分类号： S917.4

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