c-di-GMP抑制转录调控因子Clpxoo与葡聚糖酶基因启动子的结合

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李波

作者： 田芳;陈华民;吴茂森;何晨阳

作者机构：

关键词： 水稻白叶枯病菌;c-di-GMP;信号受体蛋白;启动子;结合作用

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2013 年 53 卷 11 期

页码： 1166-1171

收录情况： CSCD

摘要： 【目的】阐明水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)c-di-GMP信号受体和转录调控因子Clpxoo对葡聚糖酶基因(engAxoo)的转录调控作用机制。【方法】通过基因表达载体的构建和转化、蛋白诱导表达及其Ni-NTA Resin亲和层析,进行了clpxoo基因的原核表达和产物纯化。通过荧光素(FAM)探针标记和凝胶阻滞试验(EMSA)对Clpxoo纯化蛋白与葡聚糖酶基因启动子(engAxoo-p)的结合活性及其c-diGMP信号分子的抑制作用进行了测定分析。【结果】在优化的诱导表达和纯化条件下,成功地获得了Clpxoo纯化蛋白。Clpxoo可与engAxoo-p序列发生阻滞现象,表明它具有与启动子特异性结合的活性。在反应体系中加入c-di-GMP可导致结合作用的消除。【结论】Clpxoo接受c-di-GMP信号后,可能通过构象的改变,从而与engAxoo-p的结合活性受到抑制;优化的Clpxoo蛋白纯化和EMSA方法可以用于后续的调控元大规模鉴定的研究。

分类号： S435.111.4

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