云南红豆杉紫杉烯合成酶基因克隆、序列分析与植物表达载体的构建
文献类型: 中文期刊
第一作者: 梁素钰
作者: 梁素钰;和丽岗;郑学勤
作者机构:
关键词: 云南红豆杉;紫杉烯合成酶;植物表达载体;cDNA克隆;紫杉醇
期刊名称: 生命科学研究
ISSN: 1007-7847
年卷期: 2005 年 9 卷 01 期
页码: 24-28
收录情况: CSCD
摘要: 利用分段RT-PCR法成功地从云南红豆杉叶片总RNA中分离出两条长约1.4kb和1.5kb的cDNA片段,克隆到pUCm-T载体中,序列拼接分析表明,该cDNA片段与WildungMR等发表的紫杉二烯合成酶基因编码区2586bp有41个核苷酸不同,同源性为98.42%,具有编码862个氨基酸蛋白质的能力.为了检测所克隆的基因编码产物是否具有活性,并进一步制备抗体以便于将来转基因植物的检测,构建了一个酵母表达载体GAPA-T14;为了转化植物构建了两个具有不同启动子的植物表达载体,pBI121-T14(含35S启动子)和pBIH-T14(在pBI121的基础上以胶乳特异启动子取代35S启动子).
分类号: S567.1
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