TLR4~(-/-)DF1细胞系感染NDV后免疫机制的初步研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王辉

作者： 王辉;鲁国涛;许曼;曾为俊;邵玉乐;赵丽丽;陈洪岩;刘建华;孟庆文

作者机构：

关键词： TLR4;CRISPR/Cas9系统;DF1;基因敲除;NDV

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2019 年 12 期

页码： 1244-1250

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为初步探究鸡TLR4在抗病毒感染天然免疫中发挥的作用,本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术针对鸡TLR4基因的功能域,设计、构建了CRISPR/Cas9双质粒表达系统,转染鸡DF1细胞;经流式细胞仪分选、测序及western blot鉴定筛选得到TLR4~(-/-)DF1细胞系;利用新城疫病毒(NDV)感染TLR4~(-/-)DF1细胞系,采用绝对荧光定量PCR检测NDV拷贝数,相对荧光定量PCR检测TLR4下游接头蛋白、细胞因子及干扰素基因的转录水平。结果显示:与野生型DF1细胞相比,NDV感染6 h、16 h和36 h的TLR4~(-/-)DF1细胞中病毒基因拷贝数显著升高(p<0.05),16 h升高了2.95倍,感染6 h、16 h和24 h下游接头蛋白My D88基因转录水平下降,感染16 h促炎因子IL-1β下降了48.5%(p<0.01),IL-8下降了62.5%(p<0.01),I型干扰素转录水平下降。以上结果表明:NDV感染诱导的天然免疫应答可能是通过My D88途径诱导高水平促炎性因子和I型干扰素(IFN-α、IFN-β)的表达,从而抑制NDV的增殖,TLR4在NDV感染引起的天然免疫应答和疾病防控研究中具有重要意义。同时,本研究TLR4~(-/-)DF1细胞系的建立可用于病毒引起的炎性因子风暴及天然免疫抗病毒作用的探究。

分类号： S852.4

  • 相关文献

[1]宿主细胞erp57基因敲除抑制流感病毒复制的研究. 胡丹,王斌,冷有龙,王玉杰,于群,郑永辉,范春玲. 2016

[2]CRISPR/Cas9介导的绵羊胎儿成纤维细胞肌肉生长抑制素基因敲除研究. 李聪,曹文广. 2015

[3]猪Toll样受体4基因SNPs功能分析. 杨秀芹,陈月婵,汪亮,李海涛,刘娣,关庆芝,付博. 2012

[4]利用体内外成熟卵母细胞生产转TLR4基因抗病克隆绵羊的研究. 徐静,卓志勇,邓守龙,张运海,刘国世,连正兴,张金龙. 2013

[5]雏鸡感染肠炎沙门氏菌后脾脏中TLR4和TLR15 mRNA表达水平的变化. 贾雪波,盛中伟,施寿荣,邹剑敏. 2016

[6]孕期开始的持续维生素A缺乏加重LPS诱导的仔鼠肠上皮屏障功能障碍. 肖露,崔婷,李莹莹,高媛,李廷玉,陈洁. 2017

[7]仔泻康口服液对脂多糖诱导的大鼠小肠炎症的改善作用及机制分析. 雒利蓉,崔东安,王慧,郝智慧,王胜义. 2020

[8]基于测序技术的海南地方猪TLR4基因多态性分析. 张艳,刘海隆,王文秀,黄丽丽. 2019

[9]TLRs受体家族及TLR4受体的功能研究. 孔维欢,王晶晶,代蓉,万鹏程,石国庆. 2018

[10]通平脂肝方对非酒精性脂肪肝小鼠肝组织炎症及TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响. 王硕,徐文轩,申明宇,李超,喇孝瑾,李继安,齐亚娟,王秀萍,吴哲. 2024

[11]12个地方品种鸡TLR4基因多态性分析. 胡艳,胡辉,朱文奇,陈雯雯,单艳菊,陈宽维,李慧芳. 2011

[12]基因群体遗传多态性检测方法的比较研究. 王兴平,罗仍卓么,许尚忠,高雪,李俊雅,任红艳,除金宝. 2008

[13]TLR4基因SNP检测及在中外鸡种中的群体变异分析. 宋咏梅,庞建建,赵桂苹,刘冉冉,李鹏,赵兴旺,郑麦青,文杰. 2010

[14]鸡Toll样受体4信号通路及在鸡沙门菌抗病研究中的应用进展. 李鹏,夏平安,宋咏梅,赵桂苹. 2009

[15]茶多酚调控机制及其对奶牛乳房炎的干预作用. 宝华,冀思同,张春华,毕力格巴图,马燕芬. 2023

[16]子宫内膜中TLR4的定位及p cDNA3.1-TLR4载体的构建. 孔维欢,代蓉,万鹏程,石国庆. 2019

[17]苏钟猪TLR4多态性及编码区C1027A功能分析. 刘筱,方晓敏,邹晓龙,赵芳,任守文. 2012

[18]鸡沙门菌遗传抗性的研究进展. 初芹,张剑,王海宏,耿爱莲,刘华贵. 2012

[19]基因修饰对鸡新城疫病毒F_(48)E_9株HN基因DNA疫苗表达效力的影响. 贺笋,石星明,王云峰,王玫,冉多良,童光志. 2008

[20]基因修饰的鸡新城疫病毒HN基因DNA疫苗免疫效力评价. 石星明,贺笋,王玫,杨桂花,曾伟伟,崔红玉,童光志,王云峰. 2009

作者其他论文 更多>>

微信小程序