鸡法氏囊B淋巴细胞全长cDNA表达文库的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张礼洲

作者： 张礼洲;祁小乐;高玉龙;王笑梅

作者机构：

关键词： IBDV;法氏囊;B淋巴细胞;SMART;cDNA表达文库

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2012 年 10 期

页码： 1012-1016

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 分离纯化了3～4周龄SPF雏鸡法氏囊B淋巴细胞的mRNA,通过琼脂糖凝胶电泳确定其质量,运用SMART技术合成第一链cDNA,LD-PCR合成第二链cDNA,经SfiⅠ酶切后定向导入真核表达质粒pEXP-Lib中,构建了全长cDNA表达文库。初级文库的库容量达1.98×105 CFU,扩增后的库容量为2.35×109CFU。PCR鉴定结果显示,文库的重组率约为100%,且插入片段分布于500～2 000bp之间。对随机挑选的22个克隆进行测序,其中20个与原鸡序列的同源性在97%以上,另外2个为未知序列。结果表明,构建的cDNA文库具备较高的库容量和重组率,为进一步筛选鸡传染性法氏囊炎病毒(IBDV)受体及感染相关基因奠定了良好基础。

分类号： S852.659.4

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