木薯MeWRKY12基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建及验证
文献类型: 中文期刊
第一作者: 郭文雅
作者: 郭文雅;王海;王亚杰;张彤;姚远;郭建春;耿梦婷;陈银华
作者机构:
关键词: CRISPR/Cas9;木薯;MeWRKY12基因
期刊名称: 分子植物育种
ISSN: 1672-416X
年卷期: 2022 年 20 卷 005 期
页码: 1554-1559
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 植物WRKY转录因子可参与植物对重金属离子的胁迫响应过程,木薯MeWRKY12基因表达受到镉(Cd)、铅(Pb)离子胁迫诱导.本研究利用在线软件CRISPR-P v2.0设计了 MeWRKY12基因的编辑靶点,构建CRISPR/Cas9基因编辑载体pCAMBIA1301-Cas9-MeWRKY12-sgRNA,并将该载体转化、侵染木薯脆性胚性愈伤组织.PCR扩增基因靶点及潜在的脱靶位点区域序列,并进行Sanger测序分析序列变化情况.结果表明,MeWRKY12基因被成功编辑,且没有脱靶现象.本研究有助于进一步获得MeWRKY12基因突变体,为解析MeWRKY12转录因子调控木薯响应Cd、Pb胁迫的分子机理打下基础.
分类号: S533
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