木薯MeWRKY12基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建及验证

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭文雅

作者： 郭文雅;王海;王亚杰;张彤;姚远;郭建春;耿梦婷;陈银华

作者机构：

关键词： CRISPR/Cas9;木薯;MeWRKY12基因

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2022 年 20 卷 005 期

页码： 1554-1559

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 植物WRKY转录因子可参与植物对重金属离子的胁迫响应过程,木薯MeWRKY12基因表达受到镉(Cd)、铅(Pb)离子胁迫诱导.本研究利用在线软件CRISPR-P v2.0设计了 MeWRKY12基因的编辑靶点,构建CRISPR/Cas9基因编辑载体pCAMBIA1301-Cas9-MeWRKY12-sgRNA,并将该载体转化、侵染木薯脆性胚性愈伤组织.PCR扩增基因靶点及潜在的脱靶位点区域序列,并进行Sanger测序分析序列变化情况.结果表明,MeWRKY12基因被成功编辑,且没有脱靶现象.本研究有助于进一步获得MeWRKY12基因突变体,为解析MeWRKY12转录因子调控木薯响应Cd、Pb胁迫的分子机理打下基础.

分类号： S533

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