鸭白细胞介素-2基因的克隆表达和单克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘瑞

作者： 刘瑞;韩先干;范红结;王少辉;刘海文;丁铲;于圣青

作者机构：

关键词： 鸭;白细胞介素-2基因;克隆;表达;单克隆抗体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2013 年 12 期

页码： 1262-1267

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研制鸭IL-2单克隆抗体,运用RT-PCR技术从樱桃谷鸭脾淋巴细胞中扩增鸭IL-2基因,将其克隆至原核表达载体pCold TF DNA中,进行诱导表达。用纯化的IL-2重组蛋白免疫BALB/c小鼠,融合后筛选抗鸭IL-2的阳性杂交瘤细胞株。通过间接ELISA法测定腹水效价、Western-blot法检测其免疫反应性,并鉴定抗体的亚类。测序结果显示,去除信号肽后的鸭IL-2基因,其编码区全长为363bp,编码120个氨基酸;SDS-PAGE检测结果表明,获得了可溶性的65ku的IL-2融合蛋白;免疫小鼠后获得3株抗鸭IL-2的阳性杂交瘤细胞株,腹水效价均达到1∶512 000以上,为IgG2b亚类。Western-blot结果表明,制备的单克隆抗体具有良好的免疫反应性。上述结果表明,成功制备了抗鸭IL-2的单克隆抗体,为进一步建立鸭IL-2的检测方法奠定了基础。

分类号： S834

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