含4种食源性病毒检测靶标多联装甲RNA的制备、纯化与定值

文献类型： 中文期刊

第一作者： 姚琳

作者： 姚琳;张奇;李风铃;张媛;逄凤娇;江艳华;王联珠;翟毓秀

作者机构：

关键词： 食源性病毒;多联装甲RNA;Qβ噬菌体;阳性质控样品;实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应

期刊名称： 食品科学

ISSN： 1002-6630

年卷期： 2019 年 08 期

页码： 293-299

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 基于Qβ噬菌体装甲RNA制备平台构建同时含有诺如病毒(norovirus,NoV)、甲肝病毒(hepatitis Avirus,HAV)、轮状病毒(rotavirus,RV)、星状病毒(astrovirus,AstV)检测靶标RNA的多联装甲RNA(multiplexarmoredRNA,AR-MulV),并进行纯化与初步定值。结果表明,重组质粒在大肠杆菌中成功表达,表达产物大小约为14.1 kDa;制备的AR-MulV经纯化后无杂蛋白与残留重组质粒,电镜下可见大量结构形态完整的病毒样颗粒,大小约为25 nm。初步定值结果显示,AR-MulV中GⅠ型NoV、GⅡ型NoV、HAV、RV和AstV检测靶标RNA的含量分别为(1.24±0.2)×10~7、(2.54±0.6)×10~7、(2.24±0.3)×10~7、(2.96±0.5)×10~7 copies/μL和(3.19±0.4)×10~7 copies/μL。本研究基于Qβ噬菌体装甲RNA制备平台成功制备同时包含4种食源性病毒标准方法检测靶标的多联装甲RNA,为食源性病毒的分子检测以及多重实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应阳性质控样品的研发提供新思路。

分类号： TS207.3

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[3]食源性病原微生物核酸标准物质研制进展. 陈天奇,齐鑫,王敏,李凯,樊丽,李亮. 2023

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