木聚糖酶XYNB的N46D突变、表达及酶学性质变化

文献类型: 中文期刊

第一作者: 杨浩萌

作者: 杨浩萌;柏映国;李江;罗会颖;王亚茹;伍宁丰;范云六;姚斌

作者机构:

关键词: 木聚糖酶;XYNB_(N46D);定点突变;pH特性

期刊名称: 中国生物化学与分子生物学报

ISSN: 1007-7626

年卷期: 2006 年 22 卷 03 期

页码: 204-211

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 对来源于Streptomyces olivaceoviridis的高比活木聚糖酶XYNB进行同源建模和同源序列比较,发现第11族木聚糖酶的催化结构域在β折叠股A3和B3之间存的一个保守的氨基酸位点,该位点与木聚糖酶的pH特性有关.据此设计了XYNB的N46D定点突变.将突变酶XYNBN46D在毕赤酵母中表达,表达的XYNBN46D经纯化后与原酶XYNB(同样经毕赤酵母表达后纯化)进行酶学性质比较,结果表明,XYNBN46D的最适pH值由5·2下降到4·2,pH稳定性也向酸性pH偏移,同时,热稳定性和最适温度也有一定的提高,但酶的比活性显著下降.结果证实,木聚糖酶XYNB的第46位Asn与其最适pH值相关.对导致酶学性质改变的可能因素进行了分析,结果为进一步的结构与功能研究提供了资料.

分类号: Q936`Q78

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