兔出血症病毒单克隆抗体的制备及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘怀然

作者： 刘怀然;秦海斌;刘家森;单安山;曲连东

作者机构：

关键词： 兔出血症病毒;单克隆抗体;抗原识别位点

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2009 年 39 卷 02 期

页码： 145-149

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立兔出血症病毒(RHDV)的检测方法及为变异株监测做储备,用蔗糖密度梯度离心法纯化的RHDV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,以昆虫细胞-杆状病毒表达的重组VP60蛋白建立的间接ELISA法筛选抗RHDV单克隆抗体杂交瘤细胞,并对其主要生物学特性进行了鉴定。结果表明,筛选出6株单抗,它们分属于IgG1(AD4,AG10,DE2)I、gG2b(BC9,BE8)和IgM(BH3)亚类;这6株单抗杂交瘤细胞的平均染色体数为87~89条,将其冻存6个月后复苏,在体外传20代的过程中分泌的抗体效价变化不大,具有很好的稳定性;Western-blot及免疫荧光分析表明,单抗DE2、AG10识别线性表位,其余4株单抗识别构象型表位;竞争ELISA试验表明,这6株单抗可识别5种抗原表位。

分类号： S852.659.6

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