生淀粉结合域SBD及糖化酶基因在毕赤酵母中的融合表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 朱婧

作者: 刘海余;王青艳;米慧芝;朱绮霞;廖思明;秦艳;申乃坤;黄日波

作者机构:

关键词: 黑曲霉ASP-S21;生淀粉糖化酶;淀粉结合域;In-fusion TM PCR Cloning;融合表达;毕赤酵母GS115

期刊名称: 广西科学

ISSN: 1005-9164

年卷期: 2016 年 23 卷 01 期

页码: 7-11

摘要: 【目的】研究生淀粉结合域SBD及糖化酶基因在毕赤酵母中的融合表达,提高酶的表达量和水解生淀粉的能力。【方法】利用In-fusionTM PCR克隆技术将淀粉结合域SBD无缝隙插入到黑曲霉糖化酶基因glu的5′端构建融合表达质粒pPIC9K-psg,实现融合酶基因psg在毕赤酵母GS115中的高效表达,并进行酶学性质研究。【结果】融合酶的最适作用条件及热稳定性均与原始酶无明显差别,但反应温度及pH值的范围更为宽泛,在反应温度60~70℃,pH值为4.0~7.0时均较稳定;融合酶PSG降解生淀粉的能力较原始酶PG提高29.6%,比原始菌株提高86.5%。【结论】淀粉结合域SBD的融合提高了糖化酶水解生淀粉的能力。

分类号: Q78`TS231

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