副溶血弧菌TDH蛋白高效表达、免疫原性分析及初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李欣彤

作者： 李欣彤;陈永军;刘迎春;白雪瑞;王少辉;韩先干;刘永杰;王权;蒋蔚

作者机构：

关键词： 副溶血弧菌;直接溶血素;蛋白表达;斑点-ELISA

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2015 年 06 期

页码： 56-62

摘要： 副溶血弧菌是引起细菌性食物中毒的主要食源性致病菌,耐热直接溶血毒素(theromostable direct hemolysin,TDH)是其公认的主要致病因子。本研究根据已发表基因序列(Gen Bank登录号:M10069)设计引物,以副溶血弧菌SHJLA株基因组DNA为模板,扩增编码TDH蛋白的基因,克隆至表达质粒p ET28a(+)中,重组质粒经限制性酶切鉴定后测序,结果表明插入片段长度为576 bp。重组原核表达质粒p ET28a-tdh转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经诱导可表达分子量约为27 k Da的融合蛋白,主要以包涵体形式表达。对包涵体进行复性,Western blot分析表明经过复性后的重组蛋白能够被感染副溶血弧菌SHJLA株的小鼠血清识别。重组蛋白免疫家兔,ELISA检测多抗血清效价在1:256 000以上。将该多抗初步应用于斑点-ELISA(DotELISA)方法的建立,TDH阳性的致病性副溶血弧菌检测到阳性斑点,而TDH阴性的副溶血弧菌及其他细菌未检测到特异性斑点。本研究可为深入研究TDH的蛋白功能,建立致病性副溶血弧菌免疫学快速诊断方法以及保护性疫苗的研制提供研究基础。

分类号： S852.61

  • 相关文献

[1]氨氮胁迫下凡纳滨对虾对副溶血弧菌的易感性. 葛红星,李健,陈萍,梁忠秀,任海,李东利. 2014

[2]一株凡纳滨对虾病原菌的分离、鉴定及其致病力分析. 张宝存,刘飞,边慧慧,刘杰,潘鲁青,黄倢. 2012

[3]副溶血弧菌的热激亚致死损伤与显微红外光谱检测. 喻文娟,施春雷,刘玉敏,代敏,史贤明. 2013

[4]养殖刺参“化板症”病原菌的分离与鉴定. 王印庚,郭伟丽,荣小军,李彬,廖梅杰,张正,陈霞,刘升平. 2012

[5]副溶血弧菌耐药谱及其对头孢类药物抗性分析. 叶灵琼,陈万义,刘卫兵,王大鹏,周敏,史贤明. 2011

[6]超高压对副溶血弧菌细胞壁膜损伤的研究. 王瑞,傅玲琳,叶立斌,励建荣. 2012

[7]副溶血弧菌总蛋白双向电泳体系的建立. 王瑞,傅玲琳,王彦波. 2013

[8]Tn5介导的致病性副溶血弧菌溶血能力差异突变株表型分析. 张茜,牛梦雅,王大鹏,史贤明. 2015

[9]不同来源副溶血弧菌分离株的遗传相关性分析. 茆丹,陈万义,周秀娟,王宏勋,周敏,施春雷,史贤明. 2015

[10]智舌快速检测副溶血弧菌簇类独立软模式识别的建立. 黄建锋,赵广英,窦文超. 2011

[11]一株兼具氨氮去除能力和对副溶血弧菌拮抗作用的有益菌的筛选及其初步应用. 王磊,王志杰,高戈,黄倢. 2016

[12]饲料中添加凝结芽孢杆菌对凡纳滨对虾生长、血清非特异性免疫指标及抗病力的影响. 王明阳,田相利,刘龙镇,李海东,李丽,董双林,范瑞用. 2018

[13]双通道荧光PCR快速检测水产品中主要致病性弧菌的研究. 帅江冰,傅玲琳,张晓峰,励建荣. 2011

[14]副溶血弧菌对凡纳滨对虾肝胰腺抗氧化酶活性和基因表达的影响. 赵伟,王雷,刘梅,蒋克勇,齐灿灿,杨广,王宝杰. 2017

[15]拟穴青蟹致病性副溶血弧菌分离鉴定及药敏试验. 陈小龙,程长洪,邓益琴,马红玲,苏友禄,冯娟,郭志勋. 2020

[16]副溶血弧菌SH112株OmpA蛋白的高效表达及免疫学特性. 王亚磊,王权,白雪瑞,别闯南,陈兆国,韩先干,蒋蔚. 2019

[17]牡蛎养殖过程中副溶血弧菌与水质因子间的关系. 林强,李宁求,付小哲,刘礼辉,石存斌,吴淑勤. 2012

[18]电泳和免疫印迹分析副溶血弧菌和溶藻弧菌主要外膜蛋白和多糖抗原. 董传甫,林天龙,许斌福,龚晖,林能锋. 2004

[19]脂肽和茶多酚对副溶血弧菌的协同抑菌效应和机理. 刘唤明,张文滔,吴燕燕,孙力军,王雅玲,刘颖,张雪梅,洪鹏志,吉宏武. 2017

[20]副溶血弧菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立. 李丹丹,徐义刚,王昱,邱索平,高会江,高慎阳. 2016

作者其他论文 更多>>

微信小程序