利用磁珠富集马铃薯BAC文库中NBS-LRR类晚疫病抗性基因

文献类型： 中文期刊

第一作者： 徐建飞

作者： 徐建飞;金黎平;庞万福;卞春松;段绍光;刘杰;黄三文;屈冬玉

作者机构：

关键词： 马铃薯;晚疫病;抗性基因;磁珠富集

期刊名称： 作物学报

ISSN： 0496-3490

年卷期： 2011 年 37 卷 05 期

页码： 764-771

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 栽培马铃薯是高度杂合的四倍体作物,利用传统的基因克隆方式进行晚疫病抗性基因分离难度很大。然而,晚疫病抗性基因具有序列保守性,属于NBS-LRR类基因。本研究中,根据晚疫病抗性基因R3a家族的序列比对结果设计R3a基因家族的保守探针,并将含有R3a基因的BAC SH23G23部分酶切成7～11kb DNA片段。通过结合保守探针的磁珠系统对上述7～11kb DNA片段进行R3a基因分离,将磁珠富集的片段克隆到双元载体pBINPLUS上。通过阳性克隆和菌落PCR鉴定表明,含有R3a基因的克隆比率达到82.76%,相对于磁珠系统富集前,提高R3a基因比率近19倍。本研究建立了抗病基因及其同源序列的磁珠分离系统,为分离马铃薯等多倍体作物中具有保守结构的基因提供了实验基础。

分类号： S532

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