球孢白僵菌真菌病毒BbPmV-4外壳蛋白多克隆抗体制备及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭文博

作者： 郭文博;路杨;隋丽;赵宇;邹晓威;张正坤;李启云

作者机构：

关键词： 球孢白僵菌;真菌病毒;外壳蛋白;多克隆抗体;定位;免疫荧光;血清学检测

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2023 年 39 卷 010 期

页码： 58-67

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 真菌病毒Beauveria bassiana polymycovirus 4(BbPmV-4)的感染能够提高寄主球孢白僵菌的致病力,然而其在寄主中的复制、传播和与寄主互作机理尚不清楚.本研究构建了真菌病毒BbPmV-4 外壳蛋白(coat protein,CP)的原核表达载体 pET-28a(+)∷BbPmV-4-CP,转化大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3),进行蛋白原核表达,免疫日本大耳兔制备了多克隆抗体,并利用间接ELISA,Western blot和免疫荧光等血清学方法进行病毒在寄主胞内定位和胞外复制的检测.结果表明,所表达BbPmV-4-CP为一种可溶性蛋白,相对分子质量约为 28.56 kD;所制备的BbPmV-4-CP兔源多克隆抗体效价为 1∶256 000;Western blot检测验证了所制备抗体能够识别对应抗原蛋白及寄主球孢白僵菌中的病毒BbPmV-4;利用所获取的多抗BbPmV-4-CP对含病毒BbPmV-4 的球孢白僵菌培养上清液及沉淀中的病毒含量进行间接ELISA检测,结果显示,培养上清液中存在病毒,表明真菌病毒BbPmV-4 可在寄主球孢白僵菌体内复制并游离到寄主体外;免疫荧光检测结果显示该病毒定位于真菌细胞核上.本研究制备了高效价和特异性的真菌病毒多克隆抗体,建立了球孢白僵菌真菌病毒的血清学检测技术体系,为研究真菌病毒在寄主体内的复制及其与寄主真菌的互作机理研究提供实验材料,并且可以利用病毒感染及其互作基因调控寄主毒力,创制高毒力球孢白僵菌菌株.

分类号：

  • 相关文献

[1]真菌病毒Beauveria bassiana chrysovirus 2(BbCV2)外壳蛋白多克隆抗体制备及应用. 路杨,郭文博,隋丽,张庆贺,赵宇,张正坤,李启云. 2024

[2]球孢白僵菌病毒BbCV2的流行及其遗传多样性. 刘洪宇,牛昕泽,孙旸,赵宇,路杨,隋丽,李启云,张正坤. 2024

[3]非洲马瘟病毒VP5蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及其抗体制备. 范亚亚,王轩莹,户鑫兵,田占成,关贵全,罗建勋,殷宏,郑玉姝,独军政. 2024

[4]多房棘球蚴RNA结合蛋白EWS的原核表达及其细胞定位与功能的初步鉴定. 严玉婷,郭小腊,孙玥,何学东,丁军涛,郑亚东. 2023

[5]蓝舌病毒VP6蛋白的原核表达及抗体制备. 张国芮,独军政,高闪电,田占成,常惠芸. 2017

[6]鳗鲡疱疹病毒免疫原性蛋白ORF36的鉴定、表达及特征分析. 陈曦,杨金先,陈华,葛均青. 2023

[7]球孢白僵菌HsbA蛋白的原核表达及免疫定位. 雷仲仁,王海鸿,吉青战. 2013

[8]真菌病毒的研究现状及其在生物防治上的应用. 张丽艳,张国民,马军韬,邓凌韦,王永力,赵茜,徐晓波. 2013

[9]核盘菌弱毒现象及其生防潜能的研究进展. 聂峰杰,黄丽丽,康振生. 2013

[10]稻瘟菌群体中dsRNA的多样性及稻瘟菌菌株QSP5中病毒对寄主生物学性状影响的研究. 唐利华,谢甲涛,程家森,付艳苹,张丽艳. 2016

[11]刺盘孢菌真菌病毒研究进展. 李春霞,李敏,高兆银,弓德强,洪小雨,姜瑛,常圣鑫,胡美姣. 2020

[12]侵染镰刀菌病毒的研究进展. 李鹏飞,乙引,郭立华. 2015

[13]真菌病毒减弱寄主致病性机理及其生防应用. 聂建华,张理航,张明明,郭立华,陈伟,王双超. 2022

[14]真菌病毒的研究进展. 莫贱友,郭堂勋,李其利,黄穗萍. 2016

[15]贵阳地区禽白血病的血清学调查. 杨峰,方英,高明琴,徐春志,袁翠霞. 2013

[16]副猪嗜血杆菌的分离鉴定与血清学检测试验. 杨茂生,吴位珩,杨莉,徐景峨,杨潇,贾慧珺,魏赐开. 2011

[17]脱毒马铃薯增产效果惊人. 程爱华,杨东乾. 1995

[18]牛传染性鼻气管炎病毒单克隆抗体的制备及阻断ELISA方法的建立. 向文杰,李德栋,林俊,陈瑞红,杨木娇,薛飞,朱远茂. 2020

[19]宁夏地区某奶牛场牛支原体的分离鉴定及药敏试验. 黎玉琼,曹胜,郭澍强,郭亚男,康晓冬,韩国宏. 2019

[20]甘蔗花叶病毒单克隆抗体的制备及其血清学检测应用. 饶黎霞,黄德青,周雪平,钱亚娟,吴建祥. 2018

作者其他论文 更多>>

微信小程序