基于高分辨熔解分析的cryl Ⅰ基因的克隆、表达及活性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵灿

作者： 张春鸽;束长龙;孙冰;宋福平;高继国;张杰

作者机构：

关键词： 苏云金芽胞杆菌;高分辨熔解分析;crylⅠ;克隆;杀虫活性

期刊名称： 中国生物防治学报

ISSN： 2095-039X

年卷期： 2013 年 001 期

页码：

收录情况： CSCD

摘要： 本研究将高分辨熔解分析(high resolution melting assay,HRMA)的方法应用于crylⅠ类基因的分型。根据已报道的crylⅠ类基因的保守区设计一对扩增片段为131bp的通用鉴定引物,利用高分辨熔点仪对产物的熔解曲线进行分析。利用此方法对本实验室保存的标准菌株HD-12进行了crylⅠ类基因的鉴定,克隆到2个新型的crylⅠb和crylⅠd基因,被Bt国际命名委员会分别正式命名为crylⅠbll和crylⅠd2。这两种基因在E.coli Rosetta菌株中能正常表达81kDa的蛋白。CrylⅠb11和CrylⅠd2蛋白对小菜蛾Plutella xylostella二龄幼虫和亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis初孵幼虫具有显著的杀虫活性,LC50分别为6.13μg·mL^-1和6.10μg·mL^-1及11.18μg·mL^-1和1.43μg·mL^-1。但对甜菜夜蛾Spodoptera exigua及鞘翅目的大猿叶甲Colaphellus bowringi均没有明显毒杀作用。高分辨溶解分析法为新型cry基因的快速、准确鉴定提供了有效的工具。

分类号： S476.11%Q786

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