对鳞翅目害虫有活性的crylC基因的克隆和表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 宋福平

作者: 宋福平;张杰;韩岚岚;高继国;黄大昉

作者机构:

关键词: 苏云金芽孢杆菌;小菜蛾;crylC基因;鳞翅目;PCIR-RFIP;克隆;表达

期刊名称: 植物保护学报

ISSN: 0577-7518

年卷期: 2003 年 002 期

页码:

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 在鉴定苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)Btc001菌株cry基因型的基础上,构建了Btc001菌株质粒DNA HindⅢ片段的文库,并利用聚合酶链式反应-限制性酶切片段多态性(PCIR-RFIP)方法筛选出含有crylC6全长基因的13.5kb大片段,酶切分析得到该片段的物理图谱,BamHI和EcoRI切完成了6.5kb含全长基因的亚克隆,并对这条6.5kb片段亚克隆、测序,序列在国际核酸序列数据库(GenBank)登记(AY007686),并由Bt杀虫晶体蛋白基因国际命名委员会命名为cry1Cb2基因.根据序列设计了一对用于扩增全长基因的引物S581CB和S381CB,扩增产物插入表达载体pET-21b中,诱导后在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达.表达产物对小菜蛾(Plutella xylostella)表现出较高活性,LC50达到7.9μg/ml.

分类号: S433.4%Q78

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