猪圆环病毒3型PCR检测方法的建立及其应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 肖琦
作者: 肖琦;茅爱华;汪伟;俞正玉;郭佳慧;袁万哲;赵攀登;温立斌;范宝超;李彬;朱雪蛟;胡屹屹;郭容利;曲梦;杨倩;何孔旺
作者机构:
关键词: 圆环病毒3型;PCR;临床应用
期刊名称: 中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2018 年 26 卷 02 期
页码: 9-14
收录情况: 北大核心
摘要: 根据Gen Bank登录的猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)全基因组序列设计并合成了一对特异性引物,经条件优化,建立了检测PCV3的PCR方法,扩增片段大小为932 bp;最低的质粒检测浓度为10 copy/μL;对猪圆环病毒1型、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒的核酸进行扩增,均无PCV3目的条带出现;随机抽取扩增的16份临床病猪样品目的条带进行TA克隆后测序,结果显示均为PCV3特异性目的片段,16株PCV3江苏毒株扩增序列与已报道的PCV3/US/SD2016和PCV3/CN/Hubei-618基因序列同源性分别为98.4%~99.6%、99.0%~99.8%,而16个毒株之间的同源性为98.3%~100%。利用所建立的PCR方法检测了2014~2017年间收集的江苏省临床病猪样品938份、健康猪样品500份,PCV3的阳性检出率分别为6.93%和0.6%;其中,2014年病猪样品中的阳性率为1.92%,后呈逐渐上升的趋势,2017年达到12.67%。本研究表明,建立的PCR方法特异、敏感,可以用于临床PCV3的检测;PCV3在江苏省猪群2014年已有感染,并呈逐年升高的趋势,应予以重视。
分类号: S852.651
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