犬干扰素α2的原核表达及抗病毒活性分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 姚凌云
作者: 姚凌云;王晶宇;欧阳伟;钱晶;吴世妍;夏兴霞;诸玉梅;王晓丽;潘群兴;芮荣;王永山
作者机构:
关键词: 重组犬干扰素α2;原核表达系统;抗病毒活性
期刊名称: 中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2018 年 26 卷 02 期
页码: 59-63
收录情况: 北大核心
摘要: 本研究将人工合成的犬干扰素α2成熟区序列插入原核表达载体p ET-28a(+)中,构建重组表达质粒p ET-28a-Ca IFN-α2;然后将该质粒转化至大肠杆菌Rosetta感受态中进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,分子量约为23 k Da的目的蛋白表达,表达的重组蛋白主要以包涵体的形式存在,表达量约占菌体总蛋白的52.5%。包涵体蛋白经变性、复性和纯化处理后,获得的重组Ca IFN-α2纯度为92%;用MDCK/VSV微量细胞病变抑制法检测重组蛋白的抗病毒活性为3.16×106/m L。本研究结果为进一步研制新型犬用干扰素制品奠定了物质基础。
分类号: S852.2
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