猪瘟病毒E2蛋白在大肠杆菌中的表达及免疫原性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王冬雨

作者： 王冬雨;魏蔷;刘运超;刘畅;杨棋;崔颖磊;张改平

作者机构：

关键词： 猪瘟病毒;E2蛋白;蛋白质纯化;血清学分析;免疫原性

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2018 年 03 期

页码： 128-133+143

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备具有免疫原性的猪瘟病毒E2蛋白,在大肠杆菌中表达E2蛋白,并对其进行纯化及免疫原性分析。将E2基因插入原核表达载体p ET-28a,构建重组质粒p ET-28a-E2,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达,SDS-PAGE电泳和Western blot分析结果显示,成功表达了可溶性E2蛋白。对IPTG浓度及诱导温度和时间进行优化,结果显示,IPTG终浓度为0.1 mmol/L时,18℃条件下诱导表达16 h,E2蛋白的可溶性表达量最高。通过分子筛一步纯化E2蛋白,其终质量浓度为0.5 g/L。Western blot分析和间接ELISA结果显示,纯化后的E2蛋白在变性及非变性条件下都能够被猪瘟阳性血清特异性识别,表明纯化后的E2蛋白活性良好。将纯化后的E2蛋白添加弗氏佐剂乳化后免疫BALB/C小鼠,采集血清进行病毒中和试验,结果显示,免疫后56 d产生较高水平的中和抗体,表明E2蛋白免疫原性良好。综上,成功利用大肠杆菌BL21(DE3)菌株表达了可溶性E2蛋白,且纯化后的E2蛋白免疫原性良好。

分类号： S852.651

  • 相关文献

[1]表达猪瘟病毒E2蛋白的BacMam病毒的构建及其免疫原性分析. 李淼,王宇飞,王煜,高辉,李娜,孙元,梁冰冰,仇华吉. 2009

[2]猪瘟病毒E2蛋白B细胞识别基序的筛选. 王爱萍,马丽平,李姣,邓瑞广,邢广绪,郝慧芳. 2008

[3]抗猪瘟病毒中和性单克隆抗体的制备与鉴定. 刘运超,陈玉梅,冯丽丽,汪磊,王聚财,陆东峰,张改平. 2019

[4]猪瘟病毒E2蛋白与猪RACK1相互作用的鉴定. 凌理军,李素,董泓,贺番,冯烁,廖亚金,申梁,孙元,翁长江,仇华吉. 2012

[5]猪瘟病毒E2蛋白酵母表达及其免疫活性研究. 周稳,金前跃,陈晓,丁培阳,李旭峰,王垚,柴永笑,张雨航,周恩民,郭军庆,郅玉宝,张改平. 2020

[6]猪瘟病毒E_2蛋白在酵母中分泌表达条件的优化. 韩雪清,刘湘涛,任芳丽,冯卫权,张涌,谢庆阁. 2003

[7]猪瘟病毒糖基化E2蛋白在重组杆状病毒中的表达与鉴定. 李文良,毛立,张纹纹,杨蕾蕾,王小敏,江杰元. 2013

[8]基于重组E2蛋白的猪瘟病毒抗体间接ELISA检测方法的建立. 孙元,夏照和,梁冰冰,彭伍平,仇华吉. 2008

[9]E2蛋白介导猪瘟病毒的细胞吸附与内化. 尹彩霞,于少雄,宋琨,李素,杨玉莹,仇华吉. 2018

[10]β-actin与猪瘟囊膜蛋白E2相互作用并参与病毒复制. 贺番,凌理军,廖亚金,李素,韩文,赵碧波,孙元,仇华吉. 2013

[11]猪瘟病毒E2蛋白A/D区单抗的制备及其抗原表位的初步研究. 张春玲,宗先伟,杨文超,张敬梅,彭明义. 2009

[12]猪瘟病毒E2基因研究进展. 唐艳强,陈彦良,刘文舒,郭小泽,肖海红,李思明. 2015

[13]3种佐剂对猪瘟病毒E2蛋白免疫效果的影响. 陈玉梅,刘运超,祁艳华,梁超,周景明,王爱萍. 2024

[14]用免疫抑制法制备猪瘟病毒野毒株E2蛋白的特异性单克隆抗体. 夏照和,彭伍平,成丹,侯强,王万利,孙元,仇华吉. 2008

[15]MEK2与猪瘟病毒E2蛋白的相互作用及其对猪瘟病毒复制的调控作用. 廖亚金,李素,贺番,李丹,孙元,罗玉子,仇华吉. 2013

[16]针对猪瘟病毒E2蛋白的实时荧光定量PCR方法的建立及应用. 高飞,姜一峰,李国新,张玉娇,李丽薇,虞凌雪,周艳君,郑海红,童光志. 2018

[17]重组猪瘟病毒C株E2蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒的构建及鉴定. 高飞,曲泽慧,姜一峰,李丽薇,虞凌雪,周艳君,杨莘,夏天奇,郑海红. 2015

[18]猪瘟病毒E2蛋白猪源化单克隆抗体的制备及其中和活性鉴定. 李淑红,刘平黄,孙慧敏,仇华吉,李素. 2023

[19]猪瘟病毒野毒株E2蛋白特异性单抗免疫抑制制备法的建立. 夏照和,彭伍平,成丹,侯强,王万利,孙元,仇华吉. 2008

[20]猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区编码基因的原核表达及抗原性研究. 刘萍,王宏博,祁光宇,刘学荣,牟克斌. 2013

作者其他论文 更多>>

微信小程序