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马铃薯多酚氧化酶基因克隆及反义表达载体构建

文献类型： 中文期刊

作者： 王清 1 ; 王蒂 1 ; 黄俊生 2 ; 郭安平 2 ;

作者机构： 1.甘肃农业大学农学院

2.中国热带农业科学院生物技术国家重点实验室

关键词： 马铃薯;PPO基因克隆;反义基因表达载体构建

期刊名称： 西北植物学报

ISSN： 1000-4025

年卷期： 2003 年 23 卷 10 期

页码： 1745-1749

收录情况： CSCD

摘要： 从甘农薯1号马铃薯试管苗叶片中提取总DNA,根据Genebank报道的马铃薯多酚氧化酶基因 POT32 序列,设计合成了带有BamH 、Sac 特定酶切位点的2对特异引物,通过PCR获得1840bP和476bP的扩增产物.测序结果表明,1840bp的扩增产物与Genebank中发表的序列一致,476bp的扩增产物正是欲扩增的马铃薯多酚氧化酶基因的同源片段.将2个扩增产物反向连接到表达载体PC3中,通过双酶切鉴定后,按直接导入法实现反义基因表达载体质粒向农杆菌EHA105的导入;并经PCR鉴定证明,此质粒已整合到农杆菌Ti上.

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