文献类型： 中文期刊

作者： 赵丽 ¹ ; 王凤龙 ¹ ; 杨慧 ² ; 李鹏 ² ; 刘满杏 ² ; 李霞 ² ;

作者机构： 1.内蒙古农业大学动物科学与医学学院

2.北京市农林科学院蔬菜研究中心

关键词： 汞;螯合抗原;单克隆抗体;酶联免疫吸附法

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2010 年 26 卷 06 期

页码： 65-71

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 汞、镉、铅等重金属引起的环境污染已在世界范围内造成危害。快速、廉价地监测生境中重金属是减小其对人类及动物危害的先决条件。传统检测方法无法满足高通量的现场检测,建立更快速、更经济的免疫分析法检测汞离子是生产及经济发展的需要。本研究中,报道了汞特异性单克隆抗体的制备与筛选方法和结果。因Hg2+太小以至于不能引起免疫反应,所以用螯合剂(二乙烯三胺五乙酸,DTPA)将金属离子与载体蛋白(匙孔血蓝蛋白,KLH)连接起来。成功合成、鉴定汞复合物抗原后,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合获得了稳定分泌抗体的杂交瘤细胞。用极限稀释法亚克隆,通过ELISA筛选,获得了2株稳定分泌抗汞离子抗体的细胞株(H2H5,H1H8)。小鼠腹腔注射1×107H2H5、H1H8细胞株制备腹水,腹水抗体效价都在1∶51200以上。经鉴定两株杂交瘤均为IgG1亚类,轻链为kappa型且分泌抗体稳定性较好。实验结果为汞离子残留免疫学检测方法的建立提供了技术基础,对提高风险评估工作的效率和质量,保障食品安全有重要现实意义。