文献类型： 中文期刊
作者： 任雯 1 ; 杨海侠 2 ; 陈立柱 2 ; 李雨峰 2 ; 刘亚 1 ;
作者机构： 1.北京市农林科学院玉米研究中心
2.宝瑞源生物技术(北京)有限公司
关键词： 转基因玉米;核酸层析法;快速转基因检测试纸条;定性检测
期刊名称： 生物技术进展
ISSN： 2095-2341
年卷期： 2020 年 10 卷 006 期
页码： 680-687
摘要： 随着我国转基因研究及产业化进程提速,转基因检测的重要性日益凸显,因而快速、高效的分子检测新方法的研发具有重要的生产实践及科研意义.在转基因检测中,常规PCR技术具有检测范围广的特点,但较为费时费力,且对实验条件要求较高;而胶体金蛋白试纸法检测方便、快捷,但可检范围窄.基于此,建立了一套基于核酸层析法快速转基因检测的方法体系.将经液氨研磨后的样品通过一管法提取DNA后直接进行PCR扩增,再将PCR扩增产物滴加到胶体金检测卡上,通过直接观察胶体金卡条显色状况进行结果判别.此方法最终检验出玉米内参基因ZSSⅡB及Zein、大豆内参基因SPS、水稻内参基因Lectin,转基因元件启动子CaMV35S及终止子NOS,以及抗虫基因Cry1Ab/1Ac、抗除草剂基因Bar、Pat、CP4-EPSPS及选择标记基因NPTⅡ、Pmi等外源基因;并成功检出特异性转基因事件Mir604及Bt11.研究获得的核酸层析检测方法具有灵敏度高、省时省力且对检测条件要求低等优点,集PCR法与蛋白试纸检测法二者优势于一身,可广泛应用于转基因产品的精确快速检测,为我国转基因生物安全监管提供了良好的技术支撑.
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