文献类型: 中文期刊
作者: 胡新文 1 ; 郭建春 2 ; 郑学勤 2 ;
作者机构: 1.中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室
2.中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室!海口,571101,中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室!海口,571101,中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室!海口,571101
关键词: 萝卜;抗真菌蛋白;基因克隆;测序
期刊名称: 热带作物学报
ISSN: 1000-2561
年卷期: 1998 年 03 期
页码: 57-63
收录情况: CSCD
摘要: 从开花后50~90d的萝卜种子中提取总RNA,逆转录合成CDNA第一链,通过PCR反应,得到Rs-AFP1和Rs-AFP2基因扩增产物。采用T-载体克隆技术,将二者分别插入pBluescript/Eco-RV—T克隆载体,得到重组质粒PGR-1和PGR-2,用其转化宿主菌E.coliDH5α,从阳性菌落制备测序用质粒DNA样品,在ABI370ADNA测序仪上测序。结果表明,所得Rs-AFP1和Rs-AFP2基因的PCR产物分别为327bp和293bp,二者的编码序列长均为243bp,包括起始密码和终止密码,共编码80个氨基酸,是完整的功能单位。所测序列与资料报道序列比较,其编码序列分别相差2bp和3bp,同源性为99.17%和98.75%。
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