文献类型： 中文期刊
作者： 霍秀文 1 ; 云锦凤 2 ; 米福贵 2 ; 魏建华 3 ;
作者机构： 1.内蒙古农业大学农学院
2.内蒙古农业大学生态环境学院
3.北京市农林科学院农业生物技术中心
关键词： 冰草;植株再生;P5CS基因;CBF4;CBF4启动子
期刊名称： 草地学报
ISSN： 1007-0435
年卷期： 2005 年 13 卷 02 期
页码： 172-173
收录情况： CSCD
摘要： 本研究以冰草属植物中的4个品种——蒙古冰草新品系(A.mongolicumKeng)、航道冰草(A.cristatumcv.Fairway)、诺丹冰草(A.desertorumcv.Nordan)和一个种间杂种冰草——蒙农杂种冰草(A.cristatum×A.desertorumcv.Hycrest-Mengnong)为材料,分别以幼穗为外植体建立了冰草组织培养再生体系。在此基础上,以调控脯氨酸生物合成最后一步的关键酶的突变体基因P5CS为目标基因,bar基因为筛选标记基因,用基因枪法轰击幼穗诱导的愈伤组织,获得转基因植株。利用PCR方法从拟南芥(Arabidopsisthaliana)基因组DNA中分离得到了CBF4及其启动子,并对CBF4启动子进行了序列分析和初步的功能分析。结果表明:1.冰草幼穗的取样时期为孕穗期,长度介于1.0～3.0cm的幼穗为最适宜的外植体;诱导愈伤组织的最适培养基为改良MS+2,4-D2.0mg/L,诱导率83.5%;分化培养基为MS+KT0.2mg/L,分化率74.5%;生根培养基为1/2MS,生根率100%。2.以幼穗诱导的愈伤组织为受体,采用基因枪轰击法转化冰草获得转基因植株;PCR和Southern检测表明外源基因P5CS已整合到冰草属植物基因组DNA中;RT-PCR检测表明目的基因已在冰草转基因植株的转录水平表达;P5CS基因的遗传转化率为0.09%～0.11%。3.采用PCR方法从拟南芥中分离了CBF4基因及其启动子序列,采用生物信息学
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