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嗜水气单胞菌外膜蛋白基因DNA疫苗载体的构建及分析

文献类型： 中文期刊

作者： 李盼 1 ; 李素一 2 ; 吴唯维 2 ; 林天龙 2 ; 林晨韬 2 ; 陈叙 2 ;

作者机构： 1.福建农林大学

2.福建省农业科学院生物技术研究所

关键词： 嗜水气单胞菌;DNA疫苗;外膜蛋白

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2013 年 V28 卷 09 期

页码： 844-848

摘要： 为构建嗜水气单胞菌的DNA疫苗载体,根据已发表的该菌外膜蛋白基因momp的核苷酸序列设计一对特异性引物,应用PCR技术,扩增到嗜水气单胞菌L316的主要外膜蛋白基因,并插入到真核表达载体pcDNA3上,构建成DNA疫苗,命名为pcDNA3-POMP。以纯化的原核表达蛋白GST-POMP免疫SD大鼠制备抗血清,用ELISA测定抗体效价达到1∶100 000以上;用pcDNA3-POMP质粒转染293细胞,转染48h后收集细胞,提取细胞的RNA进行RT-PCR,检测到外源基因的表达。至此,初步完成嗜水气单胞菌DNA疫苗表达载体的构建,为进一步疫苗免疫和效价的检测奠定基础。

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