文献类型： 中文期刊
作者： 唐龙飞 1 ; 刘中柱 2 ; 董可文 2 ;
作者机构： 1.福建省农科院红萍研究中心
2.福建省农科院红萍研究中心,东弗吉利亚医学院分子生物学试验室
关键词： 玉米谷氨酰胺合成酶；基因导入；pBI_（121）载体；根癌农杆菌
期刊名称： 福建农业学报
ISSN： 1008-0384
年卷期： 1998 年 V 卷 01 期
页码：
摘要： 用粘端连接法将构建于ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＦＤＢ２１３菌株中的玉米谷氨酰胺合成酶（ＭＧＳ）ｃ－ＤＮＡ亚克隆于由农杆菌质粒改造的ｐＢＩ１２１载体中。在测定的７２个转化菌中有７株（９．２％）插入ＭＧＳｃ－ＤＮＡ片段。亚克隆后的质粒ＤＮＡ用ＨｉｎｄＩＩ和ＢｓｔｘＩ酶解可确定其ｃ－ＤＮＡ片段的插入方向。结果显示，Ｐ９、Ｐ１５、Ｐ１６与Ｐ１７为正向插入，Ｐ２为反向插入的菌株。Ｐ１６质粒ＤＮＡ进一步用直接基因转化法——冻融法（Ｆｒｅｅｚｅ－ｔｈａｗ）导入农杆菌１５９５５菌株。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法与ＤＮＡ杂交法测定表明，转化菌Ａ１１已携带ＭＧＳｃ－ＤＮＡ片段。
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