文献类型： 中文期刊

作者： 陈敏氡 ¹ ; 王彬 ¹ ; 刘建汀 ¹ ; 叶新如 ¹ ; 曾美娟 ¹ ; 朱海生 ¹ ; 温庆放 ¹ ; 康玉妹 ¹ ;

作者机构： 1.福建省蔬菜遗传育种重点实验室福建省农业科学院作物研究所蔬菜研究中心/福建省蔬菜工程技术研究中心

关键词： 丝瓜;LcPPO1基因;CRISPR/Cas9技术;基因编辑

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN：

年卷期： 2021 年 003 期

页码： 105-109

摘要： [目的]通过CRISPR/Cas9系统构建丝瓜LcPPO1基因编辑载体。[方法]根据前期已经克隆得到的LcPPO1基因序列,设计2个sgRNA靶位点序列,退火制备sgRNA双链,分别与线性PCA1301-Cas9载体连接获得2个重组载体,将重组载体转化DH5α感受态细胞,再对其进行PCR鉴定及测序比对分析。[结果]2个sgRNA靶位点序列已经分别准确地连入PCA1301-Cas9载体,插入序列无突变。[结论]成功构建了丝瓜LcPPO1基因编辑载体PCA1301-Cas9-sgRNA1和PCA1301-Cas9-sgRNA2,为后续研究丝瓜LcPPO1基因功能奠定了基础。