文献类型： 中文期刊
作者： 凡改恩 1 ; 刘永忠 2 ; 郭文武 2 ;
作者机构： 1.浙江省柑橘研究所
2.华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室
关键词： 柑橘;CitSERK;载体构建;体系优化
期刊名称： 现代农业科技
ISSN： 1007-5739
年卷期： 2008 年 14 期
页码： 13-14+16
摘要： 以Kpn I和XhoI双酶切带有CitSERK基因cDNA全序列的T/A克隆载体,同时以Kpn I和XhoI双酶切PMV载体,凝胶回收目的基因片段及PMV载体骨架片段,成功构建了CitSERK基因正义与反义表达载体,并对遗传转化载体构建体系进行了优化。结果表明:以Kpn I和XhoI双酶切带有CitSERK基因的T/A克隆载体和PMV载体,成功得到带有Kpn I和XhoI双酶切位点的目的基因片段和PMV载体骨架片段;酶切检测结果显示,阳性克隆成功酶切出预期大小的CitSERK基因片段和PMV载体骨架片段;2对特异引物PCR检测结果显示,阳性克隆同时扩增出预期大小的CitSERK基因片段。
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