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拟南芥硫代葡糖苷酶基因TGG1的克隆、表达和酶学特性

文献类型： 中文期刊

作者： 张盛敏 1 ; 孙雪飘 2 ; 张家明 1 ;

作者机构： 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词： 拟南芥;芥子酶;硫代葡糖苷;重组蛋白

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2010 年 26 卷 21 期

页码： 54-58

收录情况： 北大核心

摘要： 采用RT-PCR方法克隆拟南芥硫代葡糖苷酶基因TGG1,利用毕氏酵母表达。重组蛋白用镍亲和柱纯化,获得高纯度芥子酶。重组蛋白分子量78kD,与天然TGG1分子量接近,为糖基化蛋白。TGG1信号肽在酵母中具有分泌功能,约25%芥子酶分泌到培养基中。TGG1重组蛋白具有广泛的pH适应性,最适反应温度40℃左右。其活性被低浓度Vc激活,被高浓度Vc抑制。用Hanes plot方法计算TGG1重组蛋白,以Sinigrin为底物时,Km为65μmol/L,最大反应速率Vmax为3.28μmol/(min·mg)。

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