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中药艾总DNA的提取及ISSR-PCR反应体系的优化

文献类型： 中文期刊

作者： 王惠君 1 ; 王文泉 2 ; 卢诚 2 ; 王海燕 2 ; 陈新 2 ;

作者机构： 1.琼州学院

2.中国热带农业科学院

关键词： 艾;分子标记;ISSR;传统中药

期刊名称： 贵州农业科学

ISSN： 1001-3601

年卷期： 2015 年 06 期

页码： 165-170

收录情况： 北大核心

摘要： 为探索艾的遗传多样性,采用正交试验方法 L16(45)与单因素分析法相结合对其PCR反应的5个主要因素(Mg2+、引物、模板DNA、dNTPs以及Taq酶)在4个水平上分别进行优化。结果表明:得到最佳的反应体系(20μL)为模板DNA 60ng,Mg2+2.5mmol/L,引物0.8μmol/L,dNTPs 0.15mmol/L,Taq酶1.0U。通过统计数据分析,对艾ISSR-PCR反应的影响程度依次为Mg2+浓度>引物>模板DNA>dNTPs浓度>Taq酶。

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