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兔源支气管败血波氏杆菌荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 苏进博 1 ; 王锦祥 2 ; 殷光文 1 ;

作者机构: 1.福建农林大学未来技术学院

2.福建省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词: 兔;兔波氏杆菌病;支气管败血波氏杆菌;荧光定量PCR方法;检出率

期刊名称: 福建农林大学学报(自然科学版)

ISSN: 1671-5470

年卷期: 2025 年 54 卷 001 期

页码: 110-116

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】建立兔源支气管败血波氏杆菌(Bb)的快速检测方法,用于兔波氏杆菌病的诊断。【方法】以Bb的fimX基因为靶基因,设计特异性引物并构建质粒标准品。在此基础上建立检测兔源Bb的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,对该方法的特异性、敏感性和重复性进行评价,并将该方法初步应用于临床样品的检测。【结果】荧光定量PCR方法仅对兔源Bb的检测结果呈阳性,对其他常见兔源病原菌的检测结果均呈阴性;对质粒标准品的最低检测限为13.8拷贝·μL-1,敏感性是普通PCR方法的10倍;批内重复性试验的变异系数小于2%,批间重复性试验的变异系数小于3%;对68份临床样品进行检测,阳性检出率为39.71%,比普通PCR方法的高2.95%。【结论】建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,且对临床样品的阳性检出率比普通PCR方法高,为兔源Bb的快速检测和防控提供了技术支持。

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