文献类型： 中文期刊
作者： 肖成江 1 ; 程汉 2 ; 祝建顺 1 ; 安泽伟 2 ; 黄华孙 2 ;
作者机构： 1.海南大学农学院海南海口570208
2.中国热带农业科学院橡胶研究所
关键词： 橡胶树;细胞悬浮系;均匀设计;偏最小二乘回归
期刊名称： 热带作物学报
ISSN： 1000-2561
年卷期： 2011 年 32 卷 02 期
页码： 60-65
收录情况： CSCD
摘要： 以橡胶树属种间杂交系B1(H.brasiliensis×H.nitida)的细胞悬浮系为试材,采用均匀设计结合偏最小二乘(PLS)回归,以瞬时表达率(Y1)、细胞成活率(Y2)为试验指标综合评价,以因变量最大值为优化方向,同时对两个试验指标进行回归建模。实验结果表明,正常接种后培养3 d对数期的悬浮细胞,在10μF、2 kn、1 300 V/cm的电激条件下,蔗糖浓度为0.4 mol/L的电激转化液,加入终浓度为90μg/mL的线性质粒CaMV35S-EGFP-NOS,600 mbar压强下抽真空1 min,可使细胞瞬时表达率达到0.648 1%,成活率达到56.984 7%。通过对电激转移中相关因素的优化,建立了一种适用于橡胶树悬浮细胞系较稳定的电激转移体系,为橡胶树悬浮细胞系转基因的研究提供有效方法。
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